Southern Blot是檢測基因組樣本中特定DNA序列的一種方法。主要原理是根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則，具有一定同源性的兩條核酸單鏈在適宜環(huán)境中可雜交形成雙鏈。通過凝膠電泳分離經(jīng)限制性內(nèi)切酶消化的待檢DNA分子，轉(zhuǎn)移至尼龍膜或其他固相支撐物上，固定后與標(biāo)記好的探針進(jìn)行雜交，利用放射自顯影或酶反應(yīng)顯色, 從而檢測特定DNA分子的含量。
Southern Blot實驗流程

1. 基因組提取:基因組要求完整性好,純度高

2. 基因組酶切

3. 電泳分離酶切好的DNA樣品: 20~40ug/泳道, 25-30V穩(wěn)壓電泳12-24h。

4. 轉(zhuǎn)膜

5. 探針制備

6. 預(yù)雜交

7. 雜交

8. 檢測