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外泌體microRNA定量PCR 實(shí)驗(yàn)

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外泌體microRNA定量PCR 實(shí)驗(yàn)

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外泌體microRNA定量PCR 實(shí)驗(yàn)

外泌體(Exosome)是由細(xì)胞分泌而來的微小囊泡，直徑約為30-100 nm，具有杯狀形態(tài)、雙層膜結(jié)構(gòu)，天然存在于血液、尿液、唾液、母乳和細(xì)胞培養(yǎng)基等生物體液中。包括腫瘤細(xì)胞在內(nèi)幾乎所有類型的細(xì)胞（免疫細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、干細(xì)胞)，都可以產(chǎn)生并釋放exosome。Exosome可通過細(xì)胞膜受體直接激活受體細(xì)胞，也可運(yùn)輸?shù)鞍踪|(zhì)、mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA，甚至細(xì)胞器進(jìn)入受體細(xì)胞，參與細(xì)胞間通訊。Exosome在免疫應(yīng)答、炎癥反應(yīng)、血管生成、凋亡、凝血和廢物處理等生理過程發(fā)揮關(guān)鍵作用，可作為多種疾病的早期診斷標(biāo)記物，也能作為靶向藥物的載體進(jìn)行疾病治療。
miRNA是一類22nt左右大小的非編碼分子，它可以通過外泌體從一個(gè)地方轉(zhuǎn)運(yùn)到另外一個(gè)地方行使基因沉默功能。通過檢測外泌體中miRNA表達(dá)變化，可以發(fā)現(xiàn)外泌體中miRNA特異性功能。

圖1外泌體產(chǎn)生過程的示意圖

圖2外泌體miRN PCR擴(kuò)增曲線圖3外泌體miRN PCR溶解曲線

實(shí)驗(yàn)流程：

樣品要求
血清樣品：2-4ml
外泌體樣品：1ml
RNA樣品：500ng

參考文獻(xiàn)
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Melo SA, Sugimoto H, O'Connell JT, et al. Cancer Exosomes Perform Cell-Independent MicroRNA Biogenesis and Promote Tumorigenesis. Cancer Cell, 2014.

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