circRNA(環(huán)狀RNA)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)
| 簡介： | circRNA(環(huán)狀RNA)熒光定量PCR |
| 提供商： | 上海英拜 |
| 服務(wù)名稱： | 熒光定量PCR |
| 地區(qū)： | 上海 |
circRNA熒光定量PCR實(shí)驗(yàn) circRNA 是通過特殊的選擇性剪切產(chǎn)生封閉環(huán)狀結(jié)構(gòu)的非編碼RNA。 circRNA不受RNA外切酶的影響，比線性RNA表達(dá)更穩(wěn)定。研究表明，某些特殊的 circRNA 分子富含 miRNA結(jié)合位點(diǎn)，在細(xì)胞中起到miRNA sponges的作用，進(jìn)而解除 miRNA 對其靶基因的抑制作用。ciRS-7(CDR1a)包含 63 個保守的 miR-7結(jié)合位點(diǎn)，該 circRNA 在細(xì)胞中能夠有效吸附miR-7。而miR-7 作為關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子廣泛參與癌癥途徑，如抑制在乳腺癌、膠質(zhì)瘤等癌癥中表達(dá)顯著上調(diào)的Pak1的表達(dá)；miR-7 也能通過結(jié)合α-synuclein抑制其表達(dá)。這些研究暗示ciRS-7 通過ceRNA 機(jī)制調(diào)節(jié)miR-7的功能，是神經(jīng)系統(tǒng)疾病和癌癥治療的潛在靶點(diǎn)。 圖1 circRNA轉(zhuǎn)錄過程  2 圖2 ciRs-7作用機(jī)制 由于circRNA特殊結(jié)構(gòu)及其表達(dá)豐度低的原因，circRNA定量PCR實(shí)驗(yàn)還存在一定困難。本公司經(jīng)過特殊的引物設(shè)計(jì)、反轉(zhuǎn)錄過程及PCR擴(kuò)增過程的實(shí)驗(yàn)條件優(yōu)化，能夠高效定量檢測circRNA的表達(dá)。CircRNA定量PCR實(shí)驗(yàn)流程如下： 1、樣品RNA抽提 2、RNA質(zhì)檢 3、RNA逆轉(zhuǎn)錄cDNA 4、circRNA特殊引物設(shè)計(jì)及其調(diào)試  圖3 circRNA divergent 引物設(shè)計(jì) 5、circRNA PCR擴(kuò)增6、PCR數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì) 只要您提供樣本及待檢測的circRNA名稱，本公司可為您完成后續(xù)的所有實(shí)驗(yàn)。 |
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