日本做爰无遮A片免费,扌喿辶畐的日本,鲁大师在线观看日本电影,《内衣办公室》日本动漫,巜饥渴的人妻日本》中字,强壮的公次次弄得我高潮A片日本

被逼無奈的幫兇:M2巨噬細胞促進食管癌進展

欄目:最新研究動態(tài) 發(fā)布時間:2021-02-05
FOXO1對于調(diào)節(jié)細胞因子和趨化因子非常關(guān)鍵,但是它在腫瘤微環(huán)境中的功能一直未能明確。在這篇文章中,作者表征了FOXO1的預(yù)后價值......

FOXO1對于調(diào)節(jié)細胞因子和趨化因子非常關(guān)鍵,但是它在腫瘤微環(huán)境中的功能一直未能明確。在這篇文章中,作者表征了FOXO1的預(yù)后價值,以及腫瘤來源的FOXO1M2巨噬細胞在ESCC中的相互作用。本文于2020916發(fā)表在《TheranosticsIF8.579。

技術(shù)路線:

 

主要實驗結(jié)果如下:

1、過表達FOXO1預(yù)示ESCC的不良預(yù)后和高M2巨噬細胞浸潤

52ESCC病人樣本中檢測FOXO1的表達,結(jié)果顯示腫瘤組織中顯著高于對照,隨后在144例樣本中驗證了該結(jié)果。生存曲線表明FOXO1高表達與患者不良預(yù)后相關(guān)(圖1A-C)。

隨后使用RNA測序從三株ESCC腫瘤中鑒定到22種免疫細胞浸潤,其中CD4記憶檢測T細胞,M2巨噬細胞,和單核細胞在ESCC中的浸潤水平最高(圖1D)。但是TCGA和實驗數(shù)據(jù)分析顯示,免疫細胞中只有M2巨噬細胞標志物CD206FOXO1高表達組顯著上調(diào),隨后組織(圖1E-F)。腫瘤組織的病理評估揭示更多的巨噬細胞,尤其是CD206陽性的巨噬細胞,會在腫瘤高表達FOXO1的腫瘤間質(zhì)邊緣浸潤(圖1G-H)。

1ESCC病人中,過表達FOXO1與較差的生存結(jié)果和高M2巨噬細胞浸潤相關(guān)

 2、FOXO1促進M2巨噬細胞浸潤異種腫瘤

作者將FOXO1(+)FOXO1(-)腫瘤細胞注射于裸鼠兩側(cè),3周后取腫瘤進行檢測。結(jié)果顯示FOXO1(+)組的M2巨噬細胞浸潤水平顯著高于FOXO1(-)組。此外,CD68FOXO1(+)腫瘤組織中過表達,提示腫瘤來源的FOXO1在體內(nèi)可促進巨噬細胞浸潤。FOXO1(+)腫瘤組織中浸潤的巨噬細胞主要為CD206陽性。

2 M2巨噬細胞浸潤小鼠模型

 3、FOXO1調(diào)節(jié)CCL20的表達

此前的研究表明,TNF-α刺激FOXO1過表達會顯著放大NF-κB依賴的CCL20的產(chǎn)生。此外,CCR6CCL20的受體,在多種髓細胞系表達,包括巨噬細胞。所以進一步研究FOXO1是否影響CCL20的表達,結(jié)果顯示在FOXO1(+)的腫瘤細胞中CCL20上調(diào)表達,干擾FOXO1CCL20的表達下調(diào)(圖3A-D)。

4FOXO1(+)的腫瘤細胞通過CCL20分泌促進M2巨噬細胞募集

作者發(fā)現(xiàn)當與FOXO1(+)的腫瘤細胞孵育后M2巨噬細胞的遷移顯著增加了(圖3E)。隨后用CCL20的重組蛋白處理M2巨噬細胞發(fā)現(xiàn)其遷移也顯著增加,但是使用CCL20的抗體預(yù)處理后則M2巨噬細胞的遷移降低了。與此一致,干擾FOXO1(+)的后M2巨噬細胞的遷移也顯著下降(圖3E-G)。這些結(jié)果表明FOXO1是通過分泌CCL20介導(dǎo)M2巨噬細胞遷移。

3 FOXO1(+)腫瘤細胞通過分泌CCL20促進M2巨噬細胞募集

 5、FOXO1(+)腫瘤細胞促進M0巨噬細胞向M2巨噬細胞極化

作者構(gòu)建了ESCC腫瘤細胞與M0巨噬細胞的共培養(yǎng)系統(tǒng),流式檢測結(jié)果顯示當兩者共培養(yǎng)時M2巨噬細胞的組分(CD163+/CD68+)顯著增加了(圖4A)。相反,敲除FOXO1M2極化顯示受損(圖4B)。為了全面評估誘導(dǎo)M2巨噬細胞極化表型,分析了其標志物的表達。結(jié)果發(fā)現(xiàn)FOXO1誘導(dǎo)的M2巨噬細胞顯著高表達CD206, CD163, IL10, CCL18, CLEC7A,STAT6(圖4C)。而GSEA結(jié)果顯示FOXO1誘導(dǎo)的M0巨噬細胞具有與IL-4刺激的M2巨噬細胞類似的分子特征(圖4D-E)。表明FOXO1誘導(dǎo)的巨噬細胞都是M2巨噬細胞。

6、CSF-1介導(dǎo)FOXO1誘導(dǎo)的M0巨噬細胞極化

CCL20是作者發(fā)現(xiàn)的FOXO1誘導(dǎo)M0巨噬細胞向M2極化的第一個細胞因子,但是作者發(fā)現(xiàn)CCL20并不能顯著影響M2巨噬細胞標志物的表達。于是作者依據(jù)前人的研究猜測CSF-1可能也在M2巨噬細胞分化中扮演了重要作用。結(jié)果表明CSF-1FOXO1(+)腫瘤細胞中顯著上調(diào)(圖4F-H)。隨后還發(fā)現(xiàn),沉默FOXO1CSF-1的過表達顯著減少了,并且FOXO1抗體顯著參與了CSF-1啟動子的片段的富集(圖4FI-J)。隨后,將FOXO1(+)腫瘤細胞與M0巨噬細胞在CSF-1抗體存在的情況下進行共培養(yǎng),結(jié)果發(fā)現(xiàn),CD163+/CD68+的比例顯著下降,而CSF-1刺激后CD206,CD163CCL18的表達顯著上調(diào),CD163+/CD68+的比例也顯著升高(圖4K-L)。

4 FOXO1(+)腫瘤細胞通過產(chǎn)生CSF-1促進M0巨噬細胞向M2巨噬細胞極化

 7FOXO1通過M2巨噬細胞介導(dǎo)FAK/PI3K/AKT信號促進腫瘤細胞增殖和遷移

M2巨噬細胞分泌腫瘤促進因子,包括Arg-1TGF-bCCL18,這些都與腫瘤進展相關(guān)。為了探究M2巨噬細胞對腫瘤的促進作用,作者將M2的條件培養(yǎng)基與ESCC腫瘤細胞共培養(yǎng),結(jié)果顯示其顯著促進ESCC細胞的增殖和集落形成(圖5A-B)。進一步在體內(nèi)驗證其促腫瘤作用,結(jié)果發(fā)現(xiàn)與對照相比,M2條件培養(yǎng)基處理過的ESCC細胞的成瘤更大(圖5D)。接著作者探究了M2促進腫瘤生長的通路。結(jié)果顯示,M2調(diào)節(jié)培養(yǎng)基處理過后,增強了FAK,PI3K AKT的磷酸化(圖5E)。為了驗證M2介導(dǎo)的激活,使用PI3K抑制劑LY294002阻斷結(jié)果發(fā)現(xiàn)AKT的激活被顯著抑制(圖5F)。LY294002處理后經(jīng)M2條件培養(yǎng)基誘導(dǎo)的集落形成,細胞活力和增殖都顯著減少了(圖5G)。這些結(jié)果表明M2巨噬細胞激活了FAK/PI3K/AKT通路促進腫瘤增殖。

據(jù)報道CCL18參與了多種癌癥的FAK/PI3K/AKT通路和上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化,因此,收集M0M2FOXO1(+)/(-)誘導(dǎo)的M0巨噬細胞以檢測CCL18的濃度。結(jié)果顯示,M2巨噬細胞中CCL18的表達顯著上調(diào)(圖J)。此外,CCL18重組蛋白能激活FAK/PI3K/AKT通路(圖K)??傊?,盡管M2巨噬細胞和腫瘤細胞間的相互影響較為復(fù)雜,但是這些結(jié)果表明由M2巨噬細胞分泌的CCL18是其相互關(guān)聯(lián)的因子之一。

5 M2巨噬細胞通過FAK/PI3K/AKT信號通路促進腫瘤細胞增殖和遷移

參考文獻:

Wang Ying., Lyu Zhaojie., Qin Yanru., Wang Xia., Sun Liangzhan., Zhang Yu., Gong Lanqi., Wu Shayi., Han Shuo., Tang Ying., Jia Yongxu., Kwong Dora Lai-Wan., Kam NgarWoon., Guan Xin-Yuan.(2020). FOXO1 promotes tumor progression by increased M2 macrophage infiltration in esophageal squamous cell carcinoma. Theranostics, 10(25), 11535-11548. doi:10.7150/thno.45261




惠安县| 且末县| 东乌珠穆沁旗| 通海县| 盐城市| 阿瓦提县| 濮阳市| 昭苏县| 扬中市| 北安市| 肇东市| 日照市| 凭祥市| 平凉市| 广南县| 义乌市| 延川县| 青川县| 武平县| 丁青县| 云安县| 和林格尔县| 张家港市| 湖南省| 朝阳市| 鲁甸县| 清水河县| 哈密市| 盘山县| 桦甸市| 南阳市| 陵水| 宝清县| 福州市| 兰考县| 安庆市| 淮南市| 祥云县| 新津县| 济宁市| 平舆县|